-全血基因组DNA提取试剂盒D1850-50

产品名称：Jinpan-全血基因组DNA提取试剂盒

产品型号：D1850-50

产品特点：Jinpan-全血基因组DNA提取试剂盒
使用前请根据使用量准备一些新的容器，将10×红细胞裂解液用双蒸水稀释成1×的即用型红细胞裂解液（可一次性稀释完，也可以分次稀释，一般稀释后的红细胞裂解液可保存半年以上）。

D1850-50Jinpan-全血基因组DNA提取试剂盒的详细资料：

Jinpan-全血基因组DNA提取试剂盒
使用前请根据使用量准备一些新的容器，将10×红细胞裂解液用双蒸水稀释成1×的即用型红细胞裂解液（可一次性稀释完，也可以分次稀释，一般稀释后的红细胞裂解液可保存半年以上）。
使用说明:
自备试剂：异丙醇，75%乙醇
处理血液量 1ml 5ml 10ml
红细胞裂解液(1×) 5ml 25ml 50ml
白细胞裂解液 0.5ml 2.5ml 5ml
蛋白沉淀液 1ml 2.5ml 5ml
异丙醇 1ml 5ml 10ml
75%乙醇 1ml 5ml 10ml
DNA溶解液 100ul 0.5ml 1ml
1、 样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的血液样品)：在血液样品中加入3倍体积的红细胞裂解液(请确认已经稀释过)，充分颠倒混匀，12000rpm离心1min(如为大量提取并且为大离心机，可11000转离心5min)，小心吸去上清，再加入2倍体积的红细胞裂解液，用移液器轻轻吹打沉淀，充分混匀，离心，弃上清，沉淀为白细胞。向沉淀中加500ul（以1ml全血为例）白细胞裂解液，振荡*混匀(或者用移液器吹打)。
2、65℃水浴10-20min，期间可颠倒离心管混匀数次，直看不见明显细胞为止。
3、加入1倍体积蛋白沉淀液(以1ml全血为例，加入500ul)，充分颠倒混匀，此时会出现白色沉淀，65℃水浴5min，12000rpm离心5min(或者11000转离心10min)，小心吸取上清(沉淀可能在上层，吸取下清)，放入一干净离心管中，如还有沉淀，可再次离心。
4、在上清中加入1倍体积（以1ml全血为例，加入1ml）的异丙醇，混匀。12000rpm离心5min(或者11000转离心10min)，此时可看到管低有少量白色沉淀。小心吸取上清，弃掉。
5、向离心管中加入75%乙醇，12000rpm离心1min(或者11000转离心2min)，轻轻弃去上清液，再次离心，用移液器吸取上清，请不要接触沉淀。
6、将离心管敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将离心管中残余的乙醇去除，否则乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
7、向离心管中加入100-300ul经65℃水浴预热的DNA溶解液，室温放置让DNA自然溶解。如果DNA难于溶解，可室温放置。
8、DNA电泳检测。

Jinpan-全血基因组DNA提取试剂盒
注意事项:
1. 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA段较小且提取量也下降。
2. 若试剂盒中的溶液出现沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响提取效果。
3. DNA浓度及纯度检测：得到的基因组DNA段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰， OD260值为1相当于大约 50 μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。

相关产品：
D1800 全血基因组DNA提取试剂盒
E1020 EB染色液
D1010 6×DNA Loading Buffer
T1060 50×TAE 缓冲液
T1050 5×TBE 缓冲液
M1060 D2000 DNA Ladder
M1400 1kb DNA Ladder
G8142 GoldView II型核酸染色剂(5000×)