GST- Berpharose FF
1.产品介绍
GST-琼脂糖凝胶FF是一种将谷胱甘肽键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有载量高、非特异性吸附少、流速快等特点,主要用于谷胱甘肽转移酶标记蛋白(GST融合蛋白)、谷胱甘肽转移酶和谷胱甘肽依赖蛋白的分离纯化。
2.规格
1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、20ml、100ml、500ml
3.产品性能
性能 |
指标 |
基质 |
6%琼脂糖微球 |
配基 |
谷胱甘肽 |
配基密度 |
100μmol/ml |
载量 |
10mg谷胱甘肽-S-转移酶/ml |
粒径 |
45-165μm |
推荐流速/最大流速 |
100/750 cm/h |
耐反压 |
0.3MPa |
工作温度 |
4~40℃ |
pH稳定范围-长时间/短时间 |
3~12/3~13 |
化学稳定性 |
在常用水相缓冲液、1 M乙酸(pH4.0)、6 M 盐酸胍和70%乙醇中稳定 |
储存缓冲液 |
20%乙醇 |
储存温度 |
4~8℃ |
5.使用方法:
①推荐缓冲液:
平衡缓冲液:10 mM PBS(140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.3)。
洗脱缓冲液:50 mM Tris-HCl, 10 mM还原型谷胱甘肽(GSH), pH 8.0
②平衡
用平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱,观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数不变。
③上样
切换转换阀进行上样,上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可进行线性实验找到最佳上样量。样品的预处理:置换缓冲液,澄清过滤(0.45μm、0.22μm)等。
④冲洗
用2~3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样后的层析柱,观察检测器的变化,直到电导率、pH等参数不变。此时未交换的组分将被清洗出去。
⑤洗脱
一般推荐用10 mM还原型谷胱甘肽溶液(可含缓冲成分)进行洗脱。
⑥再生
用蒸馏水按操作流速冲洗3~5个柱体积,接着用平衡液洗到平衡3~5个柱体积。再生时若有失活的蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗(CIP)法除去。
⑦在位清洗(CIP)
去除沉淀和变性蛋白:用2个柱体积的6 M盐酸胍清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5个柱体积。去除强疏水蛋白:用3~4个柱体积的70%乙醇清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5个柱体积。
6.注意事项:
1)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
2)本产品保存条件为20%乙醇,4~8℃。
3) 2-25℃,常压,避光运输。
4)仅供科研实验使用。
参数信息 | |
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外观状态: | 固体或粉末 |
质量指标: | 95%+ |
溶解条件: | 有机溶剂/水 |
CAS号: | N/A |
分子量: | N/A |
储存条件: | -20℃避光保存 |
储存时间: | 1年 |
运输条件: | 室温2周 |
生产厂家: | 上海金畔生物科技有限公司 |