从动物细胞和组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Cell & Tissue RNA

         

◆特点

•　高纯度RNA

离心法去除杂物和硅基质膜上的DNase I 处理能提取出高纯度RNA。

•　无需使用过滤器进行前处理

无需使用过滤器对样品均匀化或过滤。本试剂盒用离心法去除杂物沉淀。

•　无需苯酚、氯仿

无需苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。

•　包装附有DNase I

试剂盒内含有DNase I （RNase free），无需另外购买。

◆产品列表

ISOSPIN Cell & Tissue RNA (50次用量)

产品	包装	保存	备注
PT Extraction Buffer （组织用）	30 ml x 1 支	室温
C Extraction Buffer （细胞用）	30 ml x 1 支	室温
PT Binding Buffer	40 ml x 1 支	室温	含有乙醇
PT Wash1 Buffer	40 ml x 1 支	室温	含有乙醇（清洗液）
PT Wash2 Buffer	40 ml x 1 支	室温	含有乙醇（清洗液）
DNase I (RNase free)	2,000 units x 1 支	－20°C
10 x DNase I Buffer	1 ml x 1 支	室温/ －20°C
ddWater (RNase free)	1 ml x 8 支	室温	配制DNase I 溶液・洗脱
Spin Column	50 支 x 1 袋	冷藏	上端组成：吸附柱 下端组成：收集管

运送方法

NIPPON GENE提供直送服务，将室温品和冷藏品的试剂盒、－20°C的产品、放入干冰的泡沫箱一同放入纸箱，在常温下进行运输。

◆使用实例

步骤

　　动物培养细胞：往动物细胞（不超过3 x 106 cells）里加入600 μl的C Extraction Buffer（细胞用），用移液器溶解细胞。

　　动物组织： 取新鲜动物组织（不超过10mg）或冷冻组织置于1.5 ml微量离心管，加入600 μlPT Extraction Buffer（组织用），直接用研磨杵捣碎。

　　涡旋30 秒以上。

　　▶　提取步骤如下：

　　　

Data 1　RNA的回收量标准和吸光谱

RNA的回收量标准

HeLa细胞	15 μg RNA/106cells
Jurkat细胞	10 μg RNA/106cells
Vero 细胞	15 μg RNA/106cells
小鼠脑	1.0 μg RNA/mg tissue
小鼠肝脏	3.5 μg RNA/mg tissue
小鼠肾脏	3.0 μg RNA/mg tissue
小鼠精巢	1.5 μg RNA/mg tissue

RNA的吸光度

Data 2　从培养细胞（HeLa）中提取RNA

　　　　

　　　　　1%凝胶琼脂糖 S

　　　　　右端: Marker 6

　　　　　泳道 1, 2, 3

　　　　　　             各0.5μg

　　从1 x 106 个HeLa细胞中提取出RNA后，进行吸光值测定和电泳（n = 3）。

260/280	260/230	µg/106 cells
2.035±0.019	2.254±0.028	19.30± 4.69

◆备注

　　本产品仅用于实验研究，不能作医药及其他目的使用。

◆资料 Data Sheet

产品指南

　　·　ISOSPIN Cell & Tissue RNA（PDF 356KB）

SDS(Safety Data Sheet)

　　·　ISOSPIN Cell & Tissue RNA (PDF)

宣传册子

　　·　ISOSPIN Cell & Tissue RNA　手册（PDF 1MB）

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Q:　　与RNA提取试剂 ISOGEN 的使用区别是？

A:　　两者有以下的区别，请根据实验目的进行选择。

　　•　ISOGEN 含有苯酚等抑制RNase活性的成分，样品溶液（匀浆）可中途冷冻保存。
　　•　虽然在步骤过程中，不可保存ISOSPIN Cell & Tissue RNA，但无需苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。

　　•　ISOGEN 是在溶液分层后使用乙醇沉淀提取RNA，能简单地扩大提取。
　　•　ISOSPIN Cell & Tissue RNA 使用离心柱进行提取，操作简单，最适合多样品处理。

Q:　　用RNA later®(RNA稳定剂)保存的样本也可使用本试剂盒提取RNA吗？

A:　　可以提取。