简便·快捷的总蛋白定量检测试剂盒

蛋白质快速测定试剂盒Wako II(Protein Assay Rapid Kit Wako II)

　　本试剂盒可检测样品中的总蛋白。
　　现在，多数蛋白质定量测定法会对试管、玻璃容器等造成污染。
　　本试剂盒使用以邻苯三酚红(PR)为色素的比色法作为基本原理进行开发的。显色液操作简单，几乎不会对实验器皿造成污染。

◆特点

●　一步定量
●　显色液不需稀释
●　反应时间只需30分钟
●　显色器皿污染小

◆测定原理

邻苯三酚红(PR)与钼酸结合，在470nm处形成最大吸收波长的红色络合物。该络合物在酸性条件下与蛋白质结合，使波长发生移位，同时使试液呈现出蓝紫色。通过测定600nm附近的吸光度，对试剂中总蛋白的浓度进行测定。

◆操作概要【元胞法（cell method）】

1.　将50μL样品及3.0mL显色液充分混合*) 2.　37℃孵育30分钟 3.　测定600nm处的吸光度 4.　根据标准曲线计算蛋白质浓度 *　在微量滴定板中将10μL样品和250μL显色液进行混合

试剂盒构成 ●　显色液：310mL×1支 ●　BSA标准溶液(2mg/mL)：5mL×1支

检测范围 ●　元胞法(cell method)：62.5～2,000μg/mL ●　微量滴定板法：125～2,000μg/mL

◆标准曲线例【元胞方法（cell method）】

共存物质影响

　　共存物质对样品BSA（浓度500μg/mL）的影响为无添加的吸光度的±10%以内。

化合物	共存容许浓度	化合物	共存容许浓度
硫酸铵	0.8 mol/L	2-巯基乙醇	0.5 mol/L
二硫苏糖醇	0.5 mol/L	MES	0.7 mol/L
乙二胺四乙酸（EDTA）	0.4 mol/L	MOPS	0.2 mol/L
乙二醇双（2-氨基乙醚）四乙酸（EGTA）	0.04 mol/L	氯化钠	4 mol/L
果糖	0.1 mg/mL	氢氧化钠	0.02 mol/L
葡萄糖	0.1 mg/mL	磷酸二氢钠	1 mol/L
谷胱甘肽（还原）	0.5 mg/mL	哌嗪-1,4-二乙磺酸	0.5 mol/L
甘油	50 v/v%	SDS *)	0.01 w/v/%
甘氨酸	0.1 mol/L	叠氮化钠	0.2 w/v%
盐酸胍	0.1 mol/L	蔗糖	40 w/v%
4-羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）	0.1 mol/L	聚乙二醇辛基苯基醚	0.07 w/v%
盐酸	1 mol/L	三羟甲基氨基甲烷	2 mol/L
氯化钾	1 mol/L	非离子活性剂20	0.1 mol/L
六水氯化镁(MgCl2・6H2O)	1 mol/L	尿素	6 mol/L

*)本试剂盒易受SDS影响，此外校准曲线仅能够在SDS 浓度0.01%，BSA浓度250～2,000μg/mL的条件下制作，请注意避免增加SDS的用量。

◆相关产品

蛋白质定量试剂盒

产品编号	产品名称	规格	容量
297-73101	Protein Assay BCA Kit 使用二喹啉甲酸(BCA)的蛋白质定量试剂	蛋白质定量用	250次
168-25911	ProteinAssay Bradford Reagent 使用考马斯亮蓝(CBB)G-250的蛋白质定量试剂	蛋白质定量用	1 L

蛋白质分子量Marker

　　本产品是用于电泳、蛋白质印迹法的蛋白质分子量Marker。

产品编号	产品名称	规格	容量
预染Marker
230-02461	WIDE-VIEW™ Prestained Protein Size Marker Ⅲ WIDE-VIEW™ 预染蛋白质标记Ⅲ	电泳用	500 μL
234-02464			500 μL×3
236-02463			25 μL
蛋白质印迹法Marker
236-02723	WESTERN-VIEW™ Western Protein Size Marker (32-165kDa)	电泳用	250 μL