CytoMBrite NIR680 是一种发射光谱位于远红外与近红外区间内的新型碳菁染料，可用于标记活细胞的细胞质膜。由于其细胞毒性低，且几乎不会发生细胞间的染料迁移，所以可以用于细胞融合、粘附或迁移的示踪研究，可追踪数天到数周的时间。但是在活细胞中，染料的位置会随着培养 时间的增加而逐渐转移至细胞内部。该染料有 18-碳链结构的疏水性尾巴和一个额外的水溶性基团，因此可以插入到细胞膜，从而稳定地染色细胞，而且水溶性效果更佳，不易产生沉淀。而传统碳菁染料如 Dil、DiO 和 DiR 等，溶解性较差且容易沉淀。NIR680 可用共聚焦显微镜或红外成像系统观察结果。CytoMBrite NIR680 兼容小型动物 NIR 成像系统。
CytoMBrite NIR680 也可以用于甲醛固定后细胞的染色，同时兼容在染色后的甲醛固定步骤。此染料不适用于细菌或酵母。

2 mM in DMSO

1、悬浮细胞染色
（1）用培养基将染料进行 1:2000 稀释，使其终浓度达到 1μM。
（2）收集细胞并离心，350g，5 min。
（3）去除离心后的上清液，加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使细胞终浓度至 1×10⁶/mL。
（4）37℃ 孵育细胞 2～20 min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以 20 min 作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
（5）孵育结束后，350g，5 min 离心细胞。
（6）倾倒上清液，再次缓慢加入 37℃ 预热的培养基重悬细胞。
（7）重复（5），（6）步骤两次以上。
（8）共聚焦显微镜观察荧光，或进行后续实验。
2、贴壁细胞染色
（1）用培养基将染料按 1:2000 稀释，使其终浓度达到 1 μM。
（2）吸出培养基，加入适量的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（3）37℃ 孵育细胞 2～20 min，不同的细胞最佳培养时间不同，可以 20 min 作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
（4）吸干染料工作液，用培养液洗细胞 2～3 次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，37℃ 孵育 5 min。
（5）共聚焦显微镜观察荧光，或进行后续实验。
注：染料工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的 10 倍范围内开始摸索。

室温避光保存，有效期12 个月。

细胞膜染色，细胞融合、粘附和迁移示踪剂，小动物成像

1、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套。