hPSC解离溶液

人多功能干细胞用细胞分散溶液 提供评价用样本！

　　本品是在无饲养层培养条件下培养人ES/iPS继代细胞是使用的细胞分散溶液，不含动物或者人类来源物质，也未使用胰蛋白酶和胶原酶等酶。请与StemSure^® hPSC培养基Δ结合使用。另外，Wako还准备了评价用样本（10ml），如有需要，请填写表格申请。

◆特点

　　●无饲养层培养用

　　●不含酶

　　●无动物来源成分

　　●添加有Y-27632可用于单细胞继代培养

 

 

◆测试项目

　　●无菌测试

　　●pH

　　●渗透压

　　●内毒素

　　●支原体测试

◆使用方法

<在使用6孔板时>

1. 　　清除培养基，用D-PBS(-)清洗细胞

2. 　　清除D-PBS(-)，将1ml/well本品加进孔板

3. 　　7℃，5%CO₂条件下，培养5分钟

4. 　　敲击剥离细胞群

5. 　　加入2ml/well的ROCKi+培养基，通过移液枪吹散细胞群为单细胞。

   　　（ROCKi+培养基：指在人iPS细胞用培养基中加入Y-27632，使最终浓度变为10μmol/l的培养基。）

6. 　　将分散液移至离心管，室温下1,000rpm离心3分钟。

7. 　　去除上清。

8. 　　继代培养时，添加2ml/wellROCKi+培养基，悬浮，种植。

9. 　　冻存时，用StemSure^®冻存液悬浮，分装到保存用离心管，冻存。

〔使用注意事项〕

　　由于细胞种类和涂层剂的不同，会使培养容器中的细胞粘着性有所不同，，用hPSC解离溶液处理至敲击能使细胞剥离。

 

◆人iPS细胞的细胞分散

　　StemSure^® hPSC培养基Δ培养的人iOS细胞201B7株，添加hPSC解离溶液，观察细胞的解离状态。添加hPSC解离溶液5分钟后敲击，移液枪吹散细胞为单细胞。

◆人iPS细胞的继代

　　用StemSure^® hPSC培养基Δ和hPSC解离溶液对iPS细胞201B7株进行继代培养，细胞增殖能力可到6继代后，各种未分化Marker（Oct3/4, Nanog, rBC2LCN）的表达呈阳性。

《 細胞増殖能力 》

　　〔細胞株〕
　　　　人iPS细胞201B7株

　　〔培养基组份〕
　　　　StemSure^® hPSC培养基Δ + 35ng/ml bFGF

　　〔涂层剂〕
　　　　Matrigel^® hESC-Qualified Matrix　

　　〔细胞种植数〕
　　　　1.0×10⁵ cells/well （使用6孔板）

　

《未分化性维持》

 

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