产品简介：
在生物科研领域，经常需要去除红细胞，去除红细胞的方法有多种，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey’s Lysis Buffer。ACK 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)也称ACK Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或
血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为 NH4Cl。  
Jinpan ACK Lysis Buffer 经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。对于裂解、去除有细胞核红细胞，例如鸟或禽类的红细胞，效果不佳，裂解类似细胞时，不建议采用。本裂解液经过滤除菌，经过ACK Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
产品组成： 

编号 名称	C6801	Storage
ACK Lysis Buffer	100ml	4℃
使用说明书	1份

自备材料：
1、 胰蛋白酶
2、 离心机
3、 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液
操作步骤(仅供参考)：
(一)组织细胞样本的常规操作
1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。  
2、裂解: 加入3～5倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。  
3、离心: 4℃，400～500g 离心5min，弃红色上清。如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作。  
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤：根据实验要求加入适量 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。4℃，400～500g 离心 2～3min，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、如有必要，重复上述步骤5一次，共洗涤1～2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)
1、制备细胞悬液：新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。  
2、裂解：加入细胞 5倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解 1～2min
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。  
3、加入15～20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。  
4、离心：4℃，400～500g 离心5min，弃红色上清，本离心步骤亦可在室温下操作。
5、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2～4各一次。  
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
(三)血液样本的常规操作
1、取新鲜抗凝血，400～500g 离心5min，弃上清。  
2、 裂解: 加入6～10 倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～5min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。(特别提醒：对于鼠的血液，裂解1～2min 已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4～5min，并且裂解过程中轻轻摇动以促进红细胞裂解。)  
3、离心: 4℃，400～500g 离心5min，弃红色上清。如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作。   
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、洗涤: 根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。4℃，400～500g 离心 2～3min，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
注意： 对于微量或少量的血液样本，可以不用第 1 步操作，可直接加入 10 倍血液体积的ACK Lysis Buffer进行第2步操作，并在4℃或室温裂解4～15min。对于鼠的血液，裂解 4～5min 已经足够； 对于人的外周血，宜延长裂解时间至 10min，但通常不宜超过15min，并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。 
(四)血液样本的快速操作(无需洗涤)
1、新鲜抗凝血中加入10倍体积的ACK Lysis Buffer，轻轻吹打混匀，裂解4～15min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。（特别提醒：对于鼠的血液，裂解4～5min 已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至 10min，但通常不宜超过 15min，并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。）  
2、加入 20～ 30ml PBS、 HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。 
3、400～ 500g 离心 5min，弃红色上清。 4℃离心效果更佳。 
4、如果发现红细胞裂解丌完全，可以重复上述步骤 2和步骤 3 一次。 
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。 
注意事项： 
1、制备细胞悬液时应根据实验需要，不一定要制备成单细胞悬液。 
2、后续试验如果是用于细胞培养， 操作过程中应注意无菌操作， 尽量在超净工作台内操作。 
3、离心步骤尽量在 4℃离心机上操作。 
4、常规步骤不快速步骤的区别在于：常规步骤多了一步洗涤过程的离心，可以节省洗涤液的用量， 并且洗涤效果也更好，不需要大体积的离心管； 快速步骤少了一次离心过程， 洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。 
5、离心洗涤后，通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。 
6、如果经过 ACK Lysis Buffer 处理后的样品后续用于总 RNA 的提取，在处理细胞时不必使用 DEPC 处理的溶液，即无需在该操作中特意去除 RNase。 
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 

有效期： 12 个月有效。