Caspase 1活性检测试剂盒(比色法)

产品简介：

Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)家族在介导细胞凋亡过程的起着极其重要的作用，其成员包括Caspase1～11等，均属于蛋白酶家族。Caspase 1又称Interkeukin 1 conberting enzyme (ICE)或caspase-1，是唯一可以剪切IL-1前体蛋白或IL-18前体产生相应成熟细胞因子的Caspase家族成员。Caspase 1可以把45kD的Caspase 1前体蛋白剪切成20kD和10kD的片断，该片断可以形成异源二聚体，进一步由两个异源二聚体形成具有蛋白酶活性的四聚体。Caspase 1通过剪切Bcl-XL来调节细胞凋亡，并通过对一些细胞因子前体的剪切来调控相关免疫反应。

Jinpan Caspase 1活性检测试剂盒(比色法) (Caspase 1 Colorimetric Assay Kit) 的检测原理是利用Caspase 1催化底物acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide (Ac-YVAD–pNA)产生黄色的游离硝基苯胺pNA(p-nitroaniline)，通过测定分光光度比色法测定pNA在400～410nm处吸光值，从而间接获得caspase 1的活性。

 

产品组成：

编号 名称	C4901 50T	C4901 100T	Storage
试剂(A): Caspase Lysis buffer	10ml	20ml	4℃
试剂(B): Assay buffer	10ml	20ml	4℃
试剂(C): Ac-YVAD-pNA(2mM)	0.25ml×2	0.25ml×4	-20℃ 避光
试剂(D): pNA(10mM)	0.25ml×2	0.25ml×4	-20℃ 避光
使用说明书	1份

 

自备材料：

1.水浴锅或恒温箱

2.96孔板

3.酶标仪或分光光度计

 

 

	空白对照	高酶活性样品	低酶活性样品
Assay buffer	90μl	85μl	65μl
待测样品	0μl	5μl	25μl
Ac-YVAD-pNA(2mM)	10μl	10μl	10μl
总体积	100μl	100μl	100μl

 

 

 

注意事项：

1.建议每次测定时都做标准曲线，以使标准更准确，另外标准品需避免反复冻融。

.2如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但应考虑根据比色杯的最小检测体积，尽量采用100μl体积以内的比色杯。

3.所测样本的值高于标准曲线的上限，应用裂解液稀释样品后重新测定。

4.样品蛋白有效含量过低或Caspase激活水平过低都会导致实际测得的A405过低，应注意使蛋白浓度尽量达到1～3μg/ml，调整诱导凋亡的时间和条件。

 

有效期：12个月有效。