酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。目前较为常用的是将辣根过氧化物酶(HRP),经过碘酸钠氧化而标记在抗体IgG分子上,而制成HRP一抗体结合物。
本室向用户提供的各类酶标物,均根据本室建立的改良过碘酸钠氧化法标记而成。每种成品已加入一定浓度的BSA作为稳定剂。产品的工作浓度根据方法不用而别,用前最好-20℃冻存,避免反复化冻。应用范围:抗原决定族的抗原性分析鉴定,各种抗原、抗体的定量、定性及定位分析测定等。
工作中易产生的问题:
1.包被抗体或抗原不适,易产生阳性值较小,或产生变异,及跳管现象。
2.用抗血清不纯化,或纯化程度太低的抗体包被,则阳性值较小,或没有阳性梯度。
3.封闭不好或标记物过浓可产生对照较高。
主要性能:每支0.1ml液体,内含有HPR约200ug/支,IgG约含400ug/支,BSA300ug/支,-20℃保存,稳定一年。4℃保存约3~6个月,1:10稀释,4℃可30天左右。稀释液为:PH7.4PBST。
工作效价:直接ELISA法:1:5000~10000,1:500~2000,用TMB作底物(OD450nm)P/N=2.5~3.0为阳性。免疫印迹化:1:200~400 ,免疫组化:1:20~40,斑点免疫1:200~400