脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测试剂盒BC0665

脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测试剂盒BC0665

产品名称:脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测试剂盒

产品型号:BC0665

产品特点:脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测试剂盒
测定意义: 淀粉酶负责水解淀粉,主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。

BC0665脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测试剂盒的详细资料:

脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测试剂盒

脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性测定试剂盒说明书
微量法
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号: BC0665
规格: 100T/48S
产品内容:
提取液:液体 110 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 20 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 3mL 蒸馏水充分溶解。
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 3.5 mL 蒸馏水充分溶解。
试剂四:液体 8 mL×1 瓶,4℃避光保存。
标准品:粉剂 10 mg×1 支,4℃避光保存。临用前加入 1 mL 蒸馏水,配制成 10 mg/mL 的标准溶液。

产品简介:
脱氢抗坏血酸还原酶(Dehydroascorbate reductase,DHAR)是植物体内一种重要的抗氧化酶,是抗坏血酸-谷胱甘肽氧化循环中促进抗坏血酸再生的关键酶。DHAR 在循环中利用抗坏血酸维持植物体内抗坏血酸的正常代谢水平,保护细胞组分抵御氧化损伤方面发挥着重要作用。DHAR 催化还原性谷胱甘肽(GSH)还原脱氢抗坏血酸(DHA)生成 AsA,GSH 能和 5,5’-二硫代-双-(2-硝ji苯甲酸)(DTNB)反应产生 2-硝基-5-巯ji苯甲酸(TNB)和谷胱甘肽二硫化物(GSSG)。TNB 在波长 412 nm 处具有大光吸收。通过测定 GSH 的减少速率,计算 DHAR 活性。

自备仪器和用品:
研钵/匀浆器、冰、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液器和蒸馏水。 

操作步骤:
一、样品的处理
1. 组织:按照组织质量(g): 提取液体积(mL)1 : 5-10 的比例(建议称取约 0.1 g 组织,加提取液 1 mL),冰上充分研磨匀浆,8000 g,4℃ 离心 10 min,取上清液置于冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500-1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1 mL 提取液),冰浴超声超声破碎细胞(功率 300w,超声 3s,间隔 7s,总时间 3 min);然后 8000 g,4℃,离心 10 min,取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体:直接检测。

二、DHAR 测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min,调节波长到 412 nm,蒸馏水调零。
2. 标准溶液的配制:将 10 mg/mL 标准液用蒸馏水稀释为 0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.0015625mg/mL 的标准溶液备用。

相关文献:
《Exogenous 24-Epibrassinolide alleviates oxidative damage from copper stress in grape (Vitis vinifera L.) cuttings》 作者:Ya-li Zhou,Su-fang Huo,Li-ting Wang,Jiang-fei Meng,Zhen-wen Zhang,Zhu-mei Xi 期刊:Plant Physiology and Biochemistry 影响因子:3.404 PMID:30099273
 

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