微量 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒BC0175

微量 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒BC0175

产品名称:微量 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒

产品型号:BC0175

产品特点:微量 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒
测定意义:SOD(EC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。

BC0175微量 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒的详细资料:

微量 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒

产品名称:超氧化物歧化酶测定试剂盒 微量法
产品英文名:Micro Superoxide dismutase(SOD) Assay Kit
产品货号:BC0175                          产地:北京市通州区马驹桥联东U8三楼
产品规格:100管/48样                      产品商标:Jinpan
保存与运输:4保存或-20保存;           参考价格:560
库存状态:现货                          
关键字:超氧化物歧化酶试剂盒|超氧化物歧化酶|SOD|SOD活性检测

简要介绍:
SOD(EC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-.),O2-.可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜,后者在560nm处有吸收;SOD可清除O2-.,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明SOD活性愈低,反之活性越高。

产品内容:
提取液:
液体 100mL×1 瓶,4保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4保存,用时加 13.2mL 双蒸水配制成悬浊液,使用前充分摇匀;
试剂三:液体 100μL×1 支,4保存;
试剂四:液体 4mL×1 瓶,4保存。
试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏

产品说明: 
SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

操作步骤: 
一、样品的前处理:
1. 细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(104个): 提取液体积(mL)为 500-1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破 碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次), 8000g4离心 10min, 取上清,置冰上待测。
2. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆;8000g4离心 10min,取上清,置冰上待测。
3. 血清(浆)样品:直接检测。
二、测定步骤:
1. 分光光度计预热 30min 以上,调节波长 560nm,蒸馏水调零。
2. 测定前将试剂一、二和四 37(哺乳动物)或 25(其它物种)水浴 5min 以上。
3. 样本测定(按顺序加入下列试剂)

  测定管 对照管 空白管1 空白管2
试剂一(μL) 45 45 45 45
试剂二(μL) 100 100 100 100
试剂四(μL) 35 35 35 35
样 品 (μL) 18 18    
双蒸水(μL)   2 18 20
试剂三(μL) 2   2  

充分混匀,室温静置 30min 后,560nm 处测定各管吸光值 A。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照,Δ A 空白=A 空 1-A 空 2。如底部有沉淀,混匀后再行测定。

注意:
1、试剂二为悬浊液,注意混匀后加入。试剂三为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。 
2、样本较多时,可按表格配置工作液(包含试剂一、二、四),试剂三必须后加入。
3、空白管 1 和空白管 2 各只需做 1~2 管;每个样本有一个对照管。
4、反应完成后,可能有沉淀生成,混匀后测定即可。

三、SOD 活性计算:
1、 抑制百分率的计算 抑制百分率=( ΔA 空白-ΔA 测定)÷ΔA 空白×100% 尽量使样品的抑制百分率在 30-70%范围内,越靠近 50%越准确。如果计算出来的抑制百分率小 于 30%或大于 70%,则通常需要调整加样量后重新测定。如果测定出来的抑制百分率偏高,则需适 当稀释样品;如果测定出来的抑制百分率偏低,则需重新准备浓度比较高的待测样品。
2、 SOD 酶活性单位:在上述黄嘌呤氧化酶藕联反应体系中抑制百分率为 50%时,反应体系中 的 SOD 酶活力定义为一个酶活力单位。
3、 SOD 酶活性计算:
(1) 血清(浆)SOD 活性(U/mL)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总]÷V 样×样本稀释倍数 =11.4×抑制百分率÷(1-抑制百分率)×样本稀释倍数
(2)组织、细菌或培养细胞 SOD 活力计算:
A 按样本蛋白浓度计算 SOD 活性(U/mgprot)=〔抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总〕÷(V 样×Cpr)×样本稀释倍数 =11.4×抑制百分率÷(1-抑制百分率)÷Cpr×样本稀释倍数
B 按样本鲜重计算 SOD 活性(U/g 鲜重)=〔抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总〕÷(W×V 样÷V 样总)×样本稀释倍数 =11.4×抑制百分率÷(1-抑制百分率)÷W×样本稀释倍数 C 按细菌或细胞个数计算 SOD 活力(U/104cell)=〔抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V 反总〕÷(500×V 样÷V 样总)×样本稀释倍数 =0.0228×抑制百分率÷(1-抑制百分率)×样本稀释倍数
V 反总:反应体系总体积,1.026mL;V 样:加入反应体系中样本的体积,0.09mL;V 样总:加 入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g;500:细胞或细菌总数, 500 万。

相关文献:
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《Amelioration of nonalcoholic fatty liver disease by swertiamarin in fructose-fed mice》 作者:Yang Yang,Li Jing,Wei Cong,He Ying,Cao Yixin ,Zhang Yongmin,Sun Wenjia,Qiao Boling,He Jiao 期刊:Phytomedicine 影响因子:4.18 PMID:31005808
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SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。

SOD(EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超 氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2主要 生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜, 后者在 560nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明 SOD 活 性愈低,反之活性越高。
 

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