BC0060 Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒BC0060

BC0060 Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒BC0060

产品名称:BC0060 Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒

产品型号:BC0060

产品特点:BC0060 Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒
Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。

BC0060BC0060 Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒的详细资料:

BC0060 Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒 

产品名称:  Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒

产品英文名 Na+K+——ATPase Assay KitAMP Content Assay Kit

产品货号:BC0060          产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:50管/24样                       产品商标:Jinpan
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:240
库存状态:现货                          
关键字:ATP酶活性检测试剂盒|ATP检测试剂盒|Na+k+ ——ATP检测试剂盒|试剂盒

简要介绍:
Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
     Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。

产品详细描述
产品内容
试剂一:液体 30mL×1 瓶,4保存。
试剂二:液体 4mL×1 瓶,4保存。
试剂三:粉剂×2支,-20保存。用时每支加1mL蒸馏水,现用现配。用不完的试剂-20可保存一周。
试剂四:液体2mL×1 瓶,4保存。
试剂五:粉剂×1 瓶,4保存。用时加入3mL双蒸水, 4保存。
试剂六:粉剂×1, 4保存。用时加入15mL双蒸水,溶解后4保存一周。
试剂七:粉剂×1, 4保存。用时加入15mL双蒸水,溶解后4保存一周。
试剂八:液体15mL×1 瓶,室温保存。
标准品:10μmol/mL 标准磷贮备液 1mL×1支,4保存。
0.5μmol/mL标准磷应用液配制将标准品 20倍稀释,即取 0.1mL标准品加1.9mL蒸馏水充分混匀。
定磷剂的配制:H2O:试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若变色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。
注意:配试剂用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
产品说明
Na+K+– ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品酶液的制备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
    细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL试剂一,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。
    组织:称取约0.1g组织,加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上,调节波长660nm,蒸馏水调零。
2、酶促反应(在EP管中加入下列试剂)

  对照管 测定管
试剂一(μL 130 90
试剂二(μL 80 80
试剂三(μL 40 40
试剂四(μL   40
样品(μL   200
混匀,37(哺乳动物)或25(其他物种)准确水浴10min
试剂五(μL 50 50
样品(μL 200  
混匀,4000g,常温离心10min,取上清液

3定磷(1.5mLEP管中依次加入下列试剂)

  空白管 标准管 对照管 测定管
0.5μmol/ml标准磷应用液(μL   100    
上清液(μL     100 100
蒸馏水(μL 100      
定磷试剂(μL 1000 1000 1000 1000

混匀,40水浴10 min,冷却室温,在 660nm处比色。
三、计算
1、血清(浆)Na+K+-ATPase活力的计算:
定义:规定每小时每毫升血清(浆)中Na+K+– ATP 酶分解ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/mL= C标准管×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)×V÷V÷T=7.5×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)

2、组织、细菌或细胞中Na+K+– ATPase活力的计算:
1)按蛋白浓度计算:
定义:规定每小时每毫克组织蛋白中Na+K+– ATP 酶分解ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/ mg prot)= C标准管×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)×V÷Cpr×V样)÷T =7.5×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷Cpr
2)按样本鲜重计算:
定义:规定每小时每克组织中Na+K+-ATP 酶分解ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/g鲜重)= C标准管×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)×V÷(V÷V样总×W)÷T=7.5×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷W
3)按细菌或细胞总数计算:
定义:规定每小时每1万个细菌或细胞中Na+K+-ATP 酶分解ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/104cell)= C标准管×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)×V÷(V÷V样总×500)÷T=0.015×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)
C标准管:标准管浓度,0.5μmol/mLV总:酶促反应总体积,0.5mLV样:加入样本体积,0.2mL V样总:加入试剂一体积,1mLT:反应时间,1/6小时;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本鲜重,g500:细菌或细胞总数,500万。
注意事项
1、由于每一个样都必须做对照,本试剂盒50管保证测 24Na+K+-ATP酶。
2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。
3、空白管和标准管只要做一管

相关文献:
《MicroRNA-98 reduces amyloid β-protein production and improves oxidative stress and mitochondrial dysfunction through the Notch signaling pathway via HEY2 in Alzheimer's disease mice》 作者:Fang?Zhou Chen, Ying Zhao, Hui?Zhao Chen 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.928 PMID:30365070
《Transcriptomic analysis reveals effects of fucoxanthin on intestinal glucose transport》 作者:Wanxiu Cao,Jing Li,Yaoxian Chin,Robert W.Li, Changhu Xue,Qingjuan Tang 期刊:Journal of Functional Foods 影响因子:3.197 PMID:

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