omega原装 胶回收kit 100T/盒D2500-01
产品名称:omega原装 胶回收kit 100T/盒
产品型号:D2500-01
产品特点:omega原装 胶回收kit 100T/盒货号:货号:规格:100T/盒E.Z.N.A® Gel Extraction Kit采用硅胶柱纯化技术,适合从各种类型各种浓度的琼脂糖凝胶中回收100bp-20kb的DNA片段,回收率可达到60-70%,可直接应用于酶促连接反应、PCR扩增、酶切以及标记等实验。
D2500-01omega原装 胶回收kit 100T/盒的详细资料:
omega原装 胶回收kit 100T/盒
货号:货号:
规格:100T/盒
商品货号: | 商品品牌: | 规格 | 基本售价: | 选择规格 |
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D2500-50T | Omega | 50T | 380.00元 |
E.Z.N.A® Gel Extraction Kit采用硅胶柱纯化技术,适合从各种类型各种浓度的琼脂糖凝胶中回收100bp-20kb的DNA片段,回收率可达到60-70%,可直接应用于酶促连接反应、PCR扩增、酶切以及标记等实验。
此外,该试剂盒还可以用从于PCR产物,酶切产物中直接纯化DNA。将目的DNA片段从琼脂糖凝胶中切下,加入Binding Buffe水浴溶解凝胶,而后转移HiBind®离心柱上离心结合DNA,经两步简单洗涤,终用Elution Buffer洗脱DNA。
快速–可以在15分钟内完成纯化工作
可靠–适的缓冲液保证DNA纯度和高回收率
安全–无须接触有害的有机物抽提
高质–纯化的DNA适合于各种应用
片段大–可回收大于10kb的DNA片段
胶回收试剂盒操作步骤(omega)
1. 配制琼脂糖EB凝胶,电泳以分离DNA片段。任何类型或等级的琼脂糖都可以使用。
我们强烈的推荐使用新鲜的TAE/TBE电泳缓冲液。不要重复使用电泳缓冲液,旧的电泳缓冲液PH会增加而降低DNA的回收产量;
2. 电泳足够时间后,在紫外灯下小心地把所需的DNA的片段切下来。并尽量去除多余的凝胶。
注意:DNA在紫外灯下的曝光的时间不要超过30秒,同时在紫外灯下操作的时候一定要戴保护眼镜。
3. 称取空离心管的重量,切下带目的片段的凝胶装在1.5ml离心管中并称其重量,求出凝胶块的重量,近似地确定其体积。一般情况下,凝胶的密度为1g/ml,于是凝胶的体积与重量的关系可按下面换算:凝胶薄片的重量为0.2g 则其体积为0.2ml;加入等倍凝胶体积的Binding Buffer,把混合物置于55℃~65℃水浴中温浴7min凝胶*融化,其间每隔2-3分钟混匀一次;
重要提醒:在凝胶*溶解之后,注意凝胶-Binding Buffer混合物的pH值。如果其pH值大于8的话,DNA的产量将大大减少。观察混合物的颜色,如果是橙色或红色,则要加入5μl 浓度为5 M,pH为5.2的醋酸钠,以调低其pH值。经过这一调节,该混合物的颜色将恢复为正常的浅黄色。一般情况下,使用新鲜的电泳缓冲液,凝胶-Binding buffer混合物的PH值的不会升高;
4. 转移700μl的DNA-琼脂糖溶液到一个HiBindTM DNA柱子,并把柱子装在一个干凈的2ml收集管内,室温下,10,000×g离心1min,弃去液体。
一个HiBind DNA柱子多可容纳700μl的溶液,如果DNA-琼脂糖混合物的体积大于700μl,可先转移700μl溶液柱子,离心完后,将余下的溶液继续加上柱子上。但是每一个HiBindTM柱子多可以结合25~30μg DNA。如果预期产量较大,则把样品分别加到合适数目的柱中。
5. 将柱子重新套回收集管中,加300μl Binding BufferHiBind DNA 柱子中;室温下,10,000×g离心 1分钟,去弃滤出液;这一步相当关键,不要忽略此步。
6. 将柱子重新套回收集管中,加入700μl SPW Wash bufferHiBind DNA柱子中,室温下,10,000×g离心1分钟,去弃滤出液;注:SPW Wash buffer在使用前必须按瓶子标鉴要求用无水乙醇进行稀释。
7. 将柱子重新套回收集管中,重复加入700μl SPW Wash bufferHiBind DNA柱子中,室温下,10,000×g离心1分钟,去弃滤出液;
8. 弃去液体,将空柱子重新套回收集管中,10,000×g离心1min以甩干柱基质残余的液体。
这步可以去除柱子基质上残余的乙醇,不要省略此步―――对得到好的DNA产量是十分重要的。
9. 把柱子装在一个干凈的1.5ml离心管上,加入30~50μl洗脱液或灭菌水上柱子膜上,10,000×g离心1分钟,离心管中的溶液就是纯化的DNA产物,保存于-20度。
如果再洗脱一次的话可以把残余的DNA洗脱出来,不过那样的浓度就会较低。
DNA的产量及质量:
把纯化产物的样品稀释一定的倍数后,分别在260nm和280nm下测其光吸收值,回收得到的DNA的浓度可按以下公式来计算: DNA浓度=光吸收260×50×稀释倍数μg/ml
长度大于500bp的片段通常能纯化得到80%的产量。 而50bp~500bp的带则可达到55%~80%的回收率。(光吸收260/光吸收280)的比率是核酸纯度的一个标记。如果此值1.8,则意味着核酸的纯度>90%。另一方面,如果纯化产物的产量较低时,可以用琼脂糖EB电泳估算产物的浓度。
omega原装 胶回收kit 100T/盒订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。
运输说明:
1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入金畔生物的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装金畔生物冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入金畔生物的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。