基因工程试剂*0感受态细胞C1200

基因工程试剂*0感受态细胞C1200

产品名称:基因工程试剂*0感受态细胞

产品型号:C1200

产品特点:基因工程试剂*0感受态细胞
货 号:C1200
规 格:10×100ul / 20×100ul
保 存:-70℃保存,运输为干冰包装。自收货之日起液氮保存少一年,-70℃保存少 6 个月。
产品简介:
本公司生产的*0 感受态细胞是采用大肠杆菌*0 菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。

C1200基因工程试剂*0感受态细胞的详细资料:

基因工程试剂*0感受态细胞
货 号:C1200
规 格:10×100ul / 20×100ul
保 存:-70℃保存,运输为干冰包装。自收货之日起液氮保存少一年,-70℃保存少 6 个月。

产品简介:
    本公司生产的*0 感受态细胞是采用大肠杆菌*0 菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19 质粒检测,转化效率可达 10 8 ,-70℃保存六个月转化效率不发生改变。
   基因型:F_ mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15△lacⅩ74 recA1 deoR araD139Δ(ara-leu)7697 galU
galK rpsL (StrR) endA1 nupG
   特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型菌株。其中 φ80lacZΔM15 基因的产物可与 pUC 载体编码的 β-半乳糖苷酶氨基端实现 α-互补,可用于蓝白斑筛选。该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

操作方法:(以下各步骤均为无菌操作)

1,将感受态细胞置于冰上融化,以下实验以 100ul 感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的 DNA,注意目的 DNA 的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一,轻轻旋转离心管以混匀内容物,冰浴放置 30 分钟。
3、将离心管置于 42℃水浴中 60-90 秒,然后快速转移到冰浴中放置 2-3 分钟,注意不要摇动离心管。
4、向离心管中加入 500ul 无菌无抗的 SOC 或 LB 培养基,37℃ 180rpm 振荡培养 1 小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的 SOC 或 LB 平板,37℃倒置培养 12-16 小时。涂布用量可根据具体实验来调整,如转化的 DNA 总量较多,可取 100ul 左右的转化产物涂板;反之,如转化的 DNA总量较少,可取 200-300ul 的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少,可通过离心后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可 4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。

注意事项:

1、感受态细胞应保存在-70℃,不可反复冻融,否则其转化效率将会降低。
2、实验过程中应严格无菌操作,防止其它 DNA 或杂菌的污染,避免为以后的筛选、鉴定带来影响。
3、转化时,转化效率与外源 DNA 的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源 DNA 量过多或体积过大
反而会降低转化效率。转化时 DNA 体积要小于感受态细胞体积的十分之一。
4、转化率的计算:转化率=产生菌落的总数/铺板 DNA 总量。
5、为防止转化实验不成功,可以保留部分连接产物,以重新转化,将损失降到低。

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运输说明:

1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入金畔生物的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装金畔生物冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入金畔生物的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
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