基因工程试剂BL21（DE3）pLysS感受态细胞C1500
产品名称：基因工程试剂BL21（DE3）pLysS感受态细胞
产品型号：C1500
产品特点：基因工程试剂BL21（DE3）pLysS感受态细胞货号：C1500规格：10×100ul / 20×100ul保存：-70℃保存，干冰运输。自收货之日起液氮保存少一年，-70℃保存少 6 个月。产品简介：本公司生产的BL21（DE3）pLysS感受态细胞是采用大肠杆菌BL21（DE3）pLysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。
C1500基因工程试剂BL21（DE3）pLysS感受态细胞的详细资料：
基因工程试剂BL21（DE3）pLysS感受态细胞
货号：C1500
规格：10×100ul / 20×100ul
保存：-70℃保存，干冰运输。自收货之日起液氮保存少一年，-70℃保存少 6 个月。
产品简介：
本公司生产的BL21（DE3）pLysS感受态细胞是采用大肠杆菌BL21（DE3）pLysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19 质粒检测，转化效率可达 10 7 ，-70℃保存 6 个月转化效率不发生改变。
基因型：F-, ompT, hsdSB(rB-mB-), dcm, gal(DE3), pLysS, Cmr
特点：该菌株带有质粒 pLysS，因此具有氯霉素抗性。质粒 pLysS 含有表达 T7 溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
操作方法：（以下各步骤均为无菌操作）
1、将感受态细胞置于冰上融化，以下实验以 100ul 感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的 DNA，注意目的 DNA 的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一，轻轻旋转离心管以混匀内容物，冰浴放置 30 分钟。
3、将离心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒，然后快速转移到冰浴中放置 2-3 分钟，不要摇动离心管。
4、向离心管中加入 500ul 无菌无抗的 SOC 或 LB 培养基，37℃ 150rpm 振荡培养 1 小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的 SOC 或 LB 平板，37℃倒置培养 12-16 小时。涂布用量可根据具体实验来调整，如转化的 DNA 总量较多，可取 100ul 左右的转化产物涂板；反之，如转化的 DNA总量较少，可取 200-300ul 的转化产物涂板。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可 4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。
注意事项：
1、实验过程中应严格无菌操作，防止其它 DNA 或杂菌的污染，避免为以后的筛选、鉴定带来影响。
2、感受态细胞不可反复冻融，否则其转化效率将会降低。
3、转化时，转化效率与外源 DNA 的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源 DNA 量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时 DNA 体积要小于感受态细胞体积的十分之一。
4、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接产物，以重新转化，将损失将到低。
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2、低温产品：低温产品运输过程中加装金畔生物冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入金畔生物的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
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