酸性蛋白酶(ACP)活性检测试剂盒BC2280
产品名称:酸性蛋白酶(ACP)活性检测试剂盒
产品型号:BC2280
产品特点:酸性蛋白酶(ACP)活性检测试剂盒测定意义:CP是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料等。
BC2280酸性蛋白酶(ACP)活性检测试剂盒的详细资料:
酸性蛋白酶(ACP)活性检测试剂盒
产品名称:: 酸性蛋白酶(ACP)活性检测试剂盒
产品英文名: Acidic Proteinase Assay Kit
产品货号:BC2280 产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼
产品规格:50管/24样 产品商标:Jinpan
保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:650
库存状态:现货
关键字: 酸性蛋白酶检测试剂盒|ACP检测试剂盒|酸性蛋白酶|试剂盒
简要介绍:
CP是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料等。
酸性条件下,ACP催化酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,通过测定其吸光度增加,来计算ACP活性。
产品详细描述
产品内容:
提取液:液体35mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加10 mL蒸馏水溶解。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加入10 mL提取液,沸水浴中磁力搅拌溶解。
试剂三:液体50ml×1瓶,4℃保存。
试剂四:液体10mL×1瓶,4℃保存。
标准品:液体1ml×1支,0.25 μ mol/mL标准酪氨酸溶液,4℃保存。
产品说明:
ACP是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料等。
酸性条件下,ACP催化酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,通过测定其吸光度增加,来计算ACP活性。
试验所需自备仪器和样品:
研钵、台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、1.5 mL EP管和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
称约0.1g组织,加入1mL提取液,冰上充分研磨,10000rpm 4℃离心10min,取上清,即粗酶液,置冰上待测。或直接称取0.1g酶制品,加入1mL提取液,置冰上待测。
二、测定:
1.分光光度计预热30min以上,调节波长到680 nm,蒸馏水调零。
2.试剂一、试剂二和试剂三置于30℃水浴保温30min以上。
3.样本测定(在1.5mLEP管中依次加入下列试剂)
试剂名称(µL) | 对照管 | 测定管 | 空白管 | 标准管 |
粗酶液 | 100 | 100 | ||
试剂一 | 200 | |||
试剂二 | 200 | |||
混匀后30℃水浴保温10min | ||||
试剂一 | 200 | |||
试剂二 | 200 | |||
混匀后10000rpm 4℃离心10min,取上清 | ||||
上清 | 200 | 200 | ||
蒸馏水 | 200 | |||
标准品 | 200 | |||
试剂三 | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
试剂四 | 200 | 200 | 200 | 200 |
混匀后30℃水浴保温20min |
取1mL于1mL玻璃比色皿中,在680nm测定光吸收,分别记为A对照管、A测定管、A空白管、A标准管。
三、酸性蛋白酶活性计算:
(1)按蛋白浓度计算
ACP活性单位(U)定义:30℃每毫克蛋白每分钟催化水解产生1μmol酪氨酸
ACP活性(U/mg prot)
=C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V1÷(Cpr×V2)÷T
=0.125×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
AP活性单位(U)定义:30℃每克样品每分钟催化水解产生1 μ mol酪氨酸。
AP活性(U/g)
=C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V1÷(W×V2÷V3)÷T
=0.125×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W
C标准品:0.25 μ mol/mL标准酪氨酸溶液; Cpr:粗酶液蛋白质浓度(mg/mL);W:样品质量(g);V1:酶促反应总体积(mL),0.5mL;V2:加入反应体系中粗酶液体积(mL),0.1 mL;V3:粗酶液总体积(mL),1mL;T:催化反应时间(min),10min。
注意:若反应较弱,(A测定管-A对照管)差值较小,可适当延长反应时间(20-30min),即第1步水浴时间,后计算酶活时对公式进行修改。
相关文献:
《Hematopoietic Substrate-1-Associated Protein X-1 Regulates the Proliferation and Apoptosis of Endothelial Progenitor Cells Through Akt Pathway Modulation》 作者:XIN-BIN GUO,XIN DENG,YING WEI 期刊:Wiley Online Library 影响因子: PMID:29139175
《MicroRNA?93?5p increases multidrug resistance in human colorectal carcinoma cells by downregulating cyclin dependent kinase inhibitor 1A gene expression》 作者:Shi?Jun Wang, Yun?Fei Cao, Zu?Qing Yang, Zhi?Yuan Jiang, Bin Cai, Jiao Guo, Sen Zhang, Xiao?Long Zhang, Feng Gao 期刊:Oncology Letters 影响因子:0.237 PMID: