牛骨髓单个核细胞分离液试剂盒P5130
产品名称：牛骨髓单个核细胞分离液试剂盒
产品型号：P5130
产品特点：牛骨髓单个核细胞分离液试剂盒货号：P5130规格：200ml/kit保存：室温避光储存，有效期少 2 年。
P5130牛骨髓单个核细胞分离液试剂盒的详细资料：
牛骨髓单个核细胞分离液试剂盒
货号：P5130
规格：200ml/kit
保存：室温避光储存，有效期少 2 年。
试剂盒内容：
全血及组织稀释液 100ml
细胞洗涤液 100ml
试剂C 100ml
试剂E 100ml
试剂F 100ml
说明书 1 份
一、 各种动物骨髓细胞的采集方法
1. 大鼠、小鼠骨髓的采集：用颈椎脱臼法处死动物，剥离出胸骨或股骨，用注射器吸取少量的F 液，冲洗出胸骨或股骨中全部骨髓液，以500g（约1800 转/分）离心20 分钟，弃上清。沉淀以F 液重复洗涤一次后用含20%胎牛血清的全血及组织稀释液悬起（细胞浓度为2×10 8 -1×10 9 个/ml），备用。
2. 大动物骨髓的采集：
A．骨髓穿刺点定位
（1）胸骨：穿刺部位在胸骨中线,胸骨体与胸骨柄连接处，或选胸骨上1/3 部。
（2）胫骨：穿刺部位在胫骨内侧,胫骨上端的下方1 厘米处。
（3）肋骨：穿刺部位在第5～7 肋骨各自的中点上。
（4）髁骨：穿刺部位在髁前上棘后2～3 厘米的髁嵴。
（5）股骨：穿刺部位在股骨内侧面,靠下端的凹面处。
B．骨髓穿刺方法
（1）实验动物按要求固定，穿刺部位去毛、消毒、麻醉，要求局部麻醉范围直达骨膜，也可作全麻。
（2）操作人员带消毒手套，确定穿刺点，估计从皮肤到骨髓的距离并依此固定骨髓穿刺针长度。左手拇、食指绷紧穿刺点周围皮肤，右手持穿刺针在穿刺点垂直进针，小弧度左右旋转钻入，当有落空感时表示针尖已进入骨髓腔。用左手固定穿刺针，右手抽出针芯，连接注射器缓慢抽吸骨髓组织，当注射器内抽到少许骨髓时立即停止抽吸，收集骨髓细胞加入4-5ml F 液混匀，以500g（约1800 转/分）离心20 分钟，弃上清，沉淀以F 液重复洗涤两次后用含20%胎牛血清的全血及组织稀释液悬起（细胞浓度为2×10 8 -1×10 9 个/ml），备用。
（3）左手压住穿刺点周围皮肤，迅速拔出穿刺针，用棉球压迫数分钟。如穿刺的是肋骨，除压迫止血外，还需胶布封贴穿刺点，防止发生气胸。
3. 人骨髓的采集：
临床方法收集骨髓细胞加入4-5ml F液混匀，以500g（约1800转/分）离心20分钟，弃上清，沉淀以F液重复洗涤两次后用含20%胎牛血清的全血及组织稀释液悬起（细胞浓度为2×10 8 -1×10 9 个/ml），备用。
二、骨髓淋巴细胞分离方法
1．取1ml 骨髓细胞悬液与E液按1:1比例混合再与1份全血及组织稀释液混匀置20℃-30℃下自然沉降20-30分钟。吸取浑浊的上清部分，弃去底部红细胞备用。
2. 取浑浊的上清部分液体小心叠加在C 液之液面上（比例为1：1），20℃±2℃，400g（约1500 转/分），离心20 分钟（半径15cm 水平转子）。
此时离心管中由上下细胞分四层。*层;为稀释液层。第二层；为环状乳白色含所需单个核细胞层。
第三层；为透明分离液层。第四层；为极少红细胞层。收集第二层细胞放入含细胞洗涤液4-5 毫升的试管中，充分混匀后，以500g（约1800 转/分）离心20 分钟。沉淀经反复洗涤2 次即得所需单个核细胞。
注： 提取率约为80%。
分离图例：
三、 注意事项
A． 本分离液是敏光型的，在运输和贮藏过程中应在18℃-25℃避光保存，启封后置4℃保存避免微生物污染。另外，本品为真空包装，未启封前置于10℃ 以下易出现白色结晶，影响分离效果。
B． 待分离的骨髓要求新鲜，避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一定在20℃水浴箱中复温20 分钟保证分离液和所分离样本温度在20℃±2℃时分离效果好，且所有操作过程一定要在无菌条件下进行。
C． 由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能影响分离效果，用户可以调节离心转数，调节离心的时间，摸索的分离条件（具体分离条件各实验室自定）。
D． 好使用无静电反应的离心管，推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。
四、产品性能指标
pH 7.0-7.5
渗透压 280-340mOsmol/kg
内毒素 ≤0.5EU/ml
无菌 直接接种培养14 天后培养基澄清
澄明度及不溶性颗粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下，
含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下
五、贮藏及保存期限
18℃-25℃避光保存，有效期两年。启封后置4℃保存，有效期一周。
注：若保证无微生物污染，启封后可置4℃长期保存。但应注意保存温度较低时本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
牛骨髓单个核细胞分离液试剂盒订购说明：
1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日新价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整，部分城市可到17点整，因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后，将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。
运输说明：
1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入金畔生物的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装金畔生物冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入金畔生物的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
3、常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。