糖原含量检测试剂盒BC0340

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糖原含量检测试剂盒BC0340

产品名称：糖原含量检测试剂盒

产品型号：BC0340

产品特点：糖原含量检测试剂盒
测定原理：蒽酮法。利用强碱性提取液提取糖原，在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。

BC0340糖原含量检测试剂盒的详细资料：

 

产品名称: 糖原含量检测试剂盒

产品英文名: Glycogen Assay Kit

产品货号：BC0340     产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格：50管/48样         产品商标：Jinpan
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：190
库存状态：现货                          
关键字:   糖原检测试剂盒|糖原含量检测试剂盒|糖原|试剂盒

简要介绍：
糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖，是糖的主要的储存形式之一，主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量，分别称为肝糖原和肌糖原。肝糖原可调节血糖浓度，当血糖升高时可在肝脏合成糖原，血糖降低时，肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。因此，肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时，肌糖原不能直接分解成血糖，必须先分解产生乳酸,随血液循环到肝脏,通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。

产品详细描述
产品内容：
提取液：液体50mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：0.1mg/mL 的葡萄糖标准液 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶， 4℃保存。
产品说明：
糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖，是糖的主要的储存形式之一，主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量，分别称为肝糖原和肌糖原。肝糖原可调节血糖浓度，当血糖升高时可在肝脏合成糖原，血糖降低时，肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。因此，肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时，肌糖原不能直接分解成血糖，必须先分解产生乳酸,随血液循环到肝脏,通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。
测定原理：蒽酮法。利用强碱性提取液提取糖原，在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、浓硫酸（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：

  • 糖原提取：

1﹑细胞或细菌：收集500~1000 万细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；加入0.75mL 提取液超声波破碎细菌或细胞（功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30 次）；转移10mL 试管中，置于沸水浴中煮沸20min（盖紧，防止水分散失），隔5min 振摇试管1 次，使充分混匀；取出试管冷却后，用蒸馏水定容到5mL，混匀，待测。
2﹑组织：称取0.1~0.2g 样品，置于10mL试管中；加入0.75mL提取液，置于沸水浴中煮沸20min（盖紧，防止水分散失），隔5min 振摇试管1 次，使充分混匀；待组织全部溶解后，取出试管冷却后，用蒸馏水定容到5mL，混匀，待测。

  • 步骤和加样表
  • 分光光度计预热30min 以上，调节波长620nm，蒸馏水调零。
  • 调节水浴锅95℃。
  • 试剂二工作液的配置：在试剂二中倒入10mL 蒸馏水，缓慢倒入40mL 浓硫酸，充分溶解混匀后使用。用不完的的试剂4℃有效期一周。
  • 加样表（在EP 管中反应）：

 

试剂 空白管（μL） 标准管（μL） 测定管（μL）
糖原提取液     250
试剂一   250  
蒸馏水 250    
试剂二 1000 1000 1000

混匀，置沸水浴10min（盖紧，防止水分散失），冷却，于620nm 波长处，分别读取空白管、标准管和测定管吸光度，分别记为A1、A2 和A3。
注意：1、空白管和标准管只要测一次。
      2、如果A3-A1 大于2，需要将样本用蒸馏水稀释，计算公式中乘以相应的稀释倍数。

  • 糖原含量的计算：
  • 按照样本质量计算

糖原（mg/g 鲜重）=1.11×(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷（A2-A1)÷W

  1. 按照蛋白质含量计算

糖原(mg/mg prot)=1.11×(C 标准×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷（A2-A1) ÷Cpr
3、按照细菌或细胞数量计算
糖原（mg/104 cell）=1.11×(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(细菌或细胞数量×V1÷V2)
                 = 0.555×(A3-A1)÷（A2-A1)÷细菌或细胞数量
    1.11：是此法测得葡萄糖含量换算为糖原含量的常数，即111μg 糖原用蒽酮试剂显色相当于100μg 葡萄糖用蒽酮所试剂显示的颜色；C 标准：标准管浓度，0.1mg/mL；V1：加入反应体系中糖原提取液体积，0.25mL；V2：提取液体积，5mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；细菌或细胞数量：以104为单位，万个。

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