线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测定试剂盒BC3235
产品名称:线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测定试剂盒
产品型号:BC3235
产品特点:线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测定试剂盒品牌:Jinpan | 货号:BC3235 检测方法 : 微量法 规格:100管/96样
BC3235线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测定试剂盒的详细资料:
线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测定试剂盒
产品内容:
提取液:80mL×2 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 40mL×1 瓶,4℃保存; 试剂二:粉剂×1 支,-20℃保存;溶于 1mL 丙酮,可分装后-20℃保存。临用前再用丙酮 100 倍 稀释后使用。 试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存;临用前加入 2mL 丙酮溶解备用。 试剂四:液体 2.5mL×1 瓶,4℃保存;
产品说明: 线粒体复合体Ⅱ又称琥珀酸-辅酶 Q 还原酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线 粒体中,催化琥珀酸氧化生成延胡索酸,同时辅基 FAD 还原为 FADH2,后者进一步还原氧化型辅 酶 Q 生成还原型辅酶 Q,是呼吸电子传递链的支路。 复合体Ⅱ的催化产物还原型辅酶 Q 可进一步还原 2,6-二氯吲哚酚,2,6-二氯吲哚酚在 605nm 有 特征吸收峰,通过检测 2,6-二氯吲哚酚的少速率来计算该酶活性。
试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微玻璃比色皿/96 孔板、丙 酮、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、复合体Ⅱ的提取:
(1) 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞,加入 1.0 mL 提取液,用匀浆器或研钵于冰上匀浆。
(2) 4 ℃ 600 g 离心 10min。
(3) 将上清液移另一离心管中,4 ℃ 11000 g 离心 15min。
(4) 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅱ(此步可选做,可以判断线粒体提 取效果)。
(5) 在沉淀中加入 400uL 提取液,超声波破碎(功率 20%,超声 5 秒,间隔 10 秒,重复 15 次), 用于复合体Ⅱ酶活性测定,并且用于蛋白含测定。
相关文献:
《A Damaged Oxidative Phosphorylation Mechanism Is Involved in the Antifungal Activity of Citral against Penicillium digitatum》 作者:Qiuli OuYang, Nengguo Tao* and Miaoling Zhang 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.259 PMID:29503638
线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测定试剂盒