丙酮酸脱羧酶(PDC)活性检测试剂盒BC1070
产品名称:丙酮酸脱羧酶(PDC)活性检测试剂盒
产品型号:BC1070
产品特点:丙酮酸脱羧酶(PDC)活性检测试剂盒丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒,PDC以丙酮酸为底物催化 NADH 氧化生成NAD+;通过测定NADH的减少量,可计算出PDC活性。
BC1070丙酮酸脱羧酶(PDC)活性检测试剂盒的详细资料:
丙酮酸脱羧酶(PDC)活性检测试剂盒
注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
货号: BC1070
规格: 50T/48S
产品内容:
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 36mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1 瓶,﹣20℃保存。
试剂四:粉剂×1 瓶,﹣20℃保存。
混合试剂:临用前配制,将试剂三和试剂四用适量试剂二溶解后再全部转移到试剂二中备用。
试剂五:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。
产品说明:
PDC 主要存在于酵母中,是乙醇发酵的关键酶之一,催化丙酮酸脱羧生成乙醛。
PDC 催化丙酮酸脱羧生成乙醛,添加乙醇脱氢酶(ADH)来进一步催化 NADH 还原乙醛生成乙醇和 NAD+;NADH 在 340 nm 有吸收峰,而 NAD+没有;通过测定 340 nm 光吸收下降速率,来计算PDC 活性。
试验中所需的仪器和试剂:
台式离心机、紫外分光光度计、水浴锅、1mL 石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
1、细胞或微生物样品的制备:
先收集细胞或微生物样品到离心管内,弃上清,按照每 500 万细胞或微生物加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次)。10000rpm,4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。
2、组织样品:
称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,冰上充分研磨。16000g 4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
二、测定步骤:
1、 紫外分光光度计预热 30min 以上,调节波长 340nm,蒸馏水调零。
2、 试剂一 37℃(哺乳动物)或 25℃(其他物种)水浴提前预热 30min。
相关文献:
《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者:Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin 期刊:Biotechnology for Biofuels 影响因子:5.452 PMID:
丙酮酸脱羧酶(PDC)活性检测试剂盒