组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒BC2135

组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒BC2135

产品名称:组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒

产品型号:BC2135

产品特点:组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒
测定意义:ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。
测定原理:在酸性环境中,ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚,苯酚与4-氨基安替和铁反应生成红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510nm吸光度增加速率,来计算ACP活性。

BC2135组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒的详细资料:

组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒

ACP 在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP 常用于前列腺癌的辅助诊断。在酸性环境中,ACP 催化磷酸苯二钠水解生成苯酚,苯酚与 4-氨基安替和铁反应生成红色亚醌衍生物,在 510nm 有特征光吸收;通过测定 510nm 吸光度增加速率,来计算 ACP 活性。

组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒

一、粗酶液提取: 称取约 0.1g 组织,加提取液 1mL 充分研磨,4℃、10000rpm 离心 10min,取上清液待测。血液可直接用于测定,如果浓度高的话,用提取液稀释。

二、测定步骤:

1.分光光度计预热 30 min 以上,调节波长到 510 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂一置于 37℃水浴中预热 30 min 以上。试剂名称(μL) 测定管 对照管 空白管 标准管蒸馏水 – – 20 – 1μmol/mL 标准品 – – – 20 上清液 20 – – – 试剂一 40 40 40 40 试剂二 40 40 40 40 混匀后置于 37℃水浴中保温 15min 试剂三 120 120 120 120 上清液 – 20 – – 混匀后于 510 nm 测定吸光度,分别记为 A 测定管、A 对照管、A 空白管、A 标准管。

三、ACP 活性计算: 1.按蛋白浓度计算活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生 1 μmol 酚。 ACP(U/mg pr)= [C 标准品×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)×V 样]÷(Cpr×V 样)÷T = (A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管) ÷Cpr 2.按样本鲜重计算活性单位定义:37℃中每克组织每分钟催化产生 1 μmol 酚。 ACP 活力(U/g)= [C 标准品×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)×V 样] ÷(W÷V 提取×V 样)÷T =0.067×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W 3.血液中 ACP 活性计算活性单位定义:37℃中每毫升血液每分钟催化产生 1μmol 酚。 ACP 活力(U)= [C 标准品×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)×V 样] ÷V 样÷T =0.067×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管) C 标准品:1μmol/mL; V 样:加入反应体系中上清液体积(mL),0.02mL;V 样总:1mL; T:反应时间(min),15 min;V 提取:加入提取液体积,1mL;W:样本鲜重,g。

组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂三:液体 30mL×1 瓶,4℃避光保存,变成蓝绿色不能使用。标准品:液体 1mL×1 支,1μmol/mL 酚标准液,4℃保存