通用RT-PCR试剂盒(AMV)RP1200
产品名称:Jinpan 通用RT-PCR试剂盒(AMV)
产品型号:RP1200
产品特点:Jinpan 通用RT-PCR试剂盒(AMV)本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的R
RP1200Jinpan 通用RT-PCR试剂盒(AMV)的详细资料:
Jinpan 通用RT-PCR试剂盒(AMV)
产品简介:本试剂盒适用于各种 RNA 制品的反转录反应以及随后的 PCR 扩增。它采用 AMV 进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在 25ul 反转录体系和 50ul PCR 反应体系中,还可以一次性得到足够量的 PCR 产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT 酶采用进口的 AMV,所以 cDNA 更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的 RNase 抑制剂可有效降低由于外源 RNase 污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于 cDNA 克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
Jinpan 通用RT-PCR试剂盒(AMV)
操作步骤:
一、反转录反应
1、在冰浴的无菌无 RNase 的离心管中加入如下反应成分: 0.5ug RNA 模板 5ul Oligo(dT)16引物补 RNase-free ddH2O 11.5ul
2、70℃保温 5min 后迅速在冰上冷却 5min,简短离心收集反应液后加入以下各组分: 5ul 5×AMV Buffer 2.5ul dNTPs 0.5ul RNasin 0.5ul AMV 补 RNase-free ddH2O 25ul
3、42℃温浴 60min,如果是用随机引物,请将离心管置 37℃温浴 60min。
4、反应后将离心管置冰上,反应产物可用于进行后续实验或-20℃保存。
二、PCR 反应
1、按以下各组分配制 50ul PCR 反应体系: 10×PCR Buffer 5ul dNTPs 1ul 上游引物(用户自备 10um) 1ul 下游引物(用户自备 10um) 1ul RT 反应产物 2ul Taq Polymerase 0.5ul ddH2O x ul Total Volume 50ul
2、混匀后短暂离心,PCR 仪扩增,琼脂糖凝胶电泳观察结果。
注意事项:
1、用于 cDNA 合成反应的相关试剂和耗材尽可能用 DEPC 进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。
2、RNA 样品要避免反复多次冻融,应使 RNA 在冰浴中处于融化状态。
3、如果 PCR 效果不理想,可以适当优化条件,比如改变退火温度或增加模板量。