过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒BC3595

产品名称：过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒

产品型号：BC3595

产品特点：过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒
测定意义：H2O2是生物体内常见的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化产生，由CAT和POD等催化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。一方面，H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子
测定原理：H2O2与硫

BC3595过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒的详细资料：

过氧化氢(H2O2)含量检测试剂盒

H2O2 是生物体内常见的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化产生，由 CAT 和 POD 等催化降解。H2O2 不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。一方面，H2O2 可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面 H2O2 也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。 H2O2 与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在 415nm 有特征吸收。需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、丙酮 100mL、浓盐酸 5mL、研钵和冰。

过氧化氢(H2O2)含量检测试剂盒

一、 H2O2 提取： 1. 细菌或细胞样品的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10 4 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；用试剂一定容 1mL；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 2. 组织样品的制备：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆；转移 EP 管中，用试剂一定容 1mL，8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 3. 血清（浆）样品：直接检测。

二、 测定步骤 1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长 415nm，蒸馏水调零。 2、 将试剂二、三和四 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上。 3、在 EP 管中按顺序加入下列试剂 试剂名称（μL） 测定 对照样本 250 试剂一 250 试剂二 25 25 试剂三 50 50 4000g，25℃离心 10min，弃上清，留沉淀试剂四 250 250 加入试剂四溶解沉淀后，室温静置 5min，取 200μL 转移微量石英比色皿或 96 孔板中测定 415nm 处吸光值 A。对照管只要做一次即可。计算 ΔA＝A 测定-A 对照。

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 1、标准条件下测定的回归曲线， y = 0.062x – 0.08 (x 为标准品浓度，μmol/ mL；y 为 ΔA)。 2、血清（浆）中 H2O2 含量的计算： H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.062=16.13×(ΔA＋0.08) 3、细菌、细胞或动物组织中 H2O2 含量计算（1）按照蛋白浓度计算 H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(V1×Cpr)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷Cpr 需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。（2）按照样本质量计算 H2O2 含量(μmol/g 鲜重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(W ×V1÷V2)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷W (3 ) 按照细菌或细胞密度计算： H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(500×V1÷V2)=0.032×(ΔA＋0.08) V1：加入反应体系中样本体积，0.25mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。 b. 用 96 孔板测定 的计算公式如下 1、标准条件下测定的回归曲线， y = 0.031x – 0.08 (x 为标准品浓度，μmol/ mL；y 为 ΔA)。 2、血清（浆）中 H2O2 含量的计算： H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.031=32.26×(ΔA＋0.08) 3、细菌、细胞或动物组织中 H2O2 含量计算（1）按照蛋白浓度计算 H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(V1×Cpr)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷Cpr 需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。（2）按照样本质量计算 H2O2 含量(μmol/g 鲜重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(W ×V1÷V2)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷W (3 ) 按照细菌或细胞密度计算： H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(500×V1÷V2)=0.064×(ΔA＋0.08) V1：加入反应体系中样本体积，0.25mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。注意：检测限为 1μmol/mL 或 1μmol/g 鲜重或 10nmol/mg prot

相关文献：

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