人外周血淋巴细胞分离液（内毒素0.12EU）P8890-200

产品名称：Jinpan 人外周血淋巴细胞分离液（内毒素0.12EU）

产品型号：P8890-200

产品特点：【预期用途】
适用于从人外周抗凝全血中分离单个核细胞（主要为淋巴细胞），无菌条件下所分离的细胞可用于免疫学检测。也可用于医学临床上从人外周血细胞、骨髓等组织液获取淋巴细胞。

P8890-200Jinpan 人外周血淋巴细胞分离液（内毒素0.12EU）的详细资料：

【产品名称】
通用名称：人外周血淋巴细胞分离液
产品名称：人外周血淋巴细胞分离液
英文名称：Human Lymphocyte Separation Medium

【检测原理】
密度梯度沉降法是根据细胞密度差异，借助细胞分离液和离心，进行细胞分离纯化的常用方法之一。细胞梯度密度分离液产生一定程度的密度梯度，将稀释后的全血铺层于分离液之上。离心后，红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。
本产品将葡聚糖和泛影葡胺按照一定比例混合，调整密度、渗透压、pH值，经过除菌过滤后制成一种密度在1.077g/mL并且与外周全血等渗的溶液（分离液），经过密度梯度离心，使一定密度的细胞按照相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。
【检验方法】
1. 取新鲜抗凝全血，EDTA（枸橼酸钠或肝素）抗凝剂均可。用等体积PBS或0.9% NaCl稀释全血。
2. 在离心管中加入一定体积的分离液，将稀释后的血样平铺到分离液液面上方，保持两液面界面清晰。分离液、抗凝未经稀释全血、PBS（或生理盐水）体积为1:1:1。
3. 室温，水平转子700-800g（2000-2500rpm）离心20-30min。
4. 离心结束后，管底是红细胞，中间层是分离液，上层是血浆/组织匀浆层，血浆层与分离液层之间是一层薄较致密的白膜，即：单个核细胞（包括淋巴细胞和单核细胞）层。小心吸取白膜层到另一离心管中。
5. 用PBS或RPMI 1640稀释到一定体积，颠倒混匀。室温，水平转子250g（1000rpm），离心10min，弃上清。重复洗涤1-2次。
6. 用PBS或合适的培养基将淋巴细胞重悬备用。
【主要组成成分】
本品为略带黄色透明液体，主要组成成分是葡聚糖与泛影葡胺。
【储存条件及有效期】
未开封并且4-30℃避光保存，有效期为2年；开包装后保质2周。
【适用仪器】
半径15cm水平转子离心机。
【样本要求】
本分离液要求样本为新鲜的抗凝血，血液收集时应无菌操作且储存、处理和运输过程中避免冷冻和冷藏。
【检验结果的解释】
由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能影响分离效果，用户可以调节离心转数和离心的时间，摸索佳的分离条件（具体分离条件各实验室自定）
【检验方法的局限性】
本实验要求，在正常大气压下，样本、分离液及分离环境温度为(20±5)℃。
【注意事项】
1. 启封后应置4℃保存，避免微生物的污染。
2. 细胞分离液从冰箱取出后，不可立即使用，需待溶液温度升室温时，摇匀后使用。
3. 整个分离过程中，温度应控制在（20±5）℃且无菌环境下进行，避免微生物的污染，否则会影响分离质量。
4. 为保持淋巴细胞的活性，应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层，包括淋巴细胞和单核细胞。
5. 分离时请严格按照比例，每一份淋巴细胞分离液加两份稀释后的血液。