人外周血淋巴细胞分离液（FICOLL配制）P8900-200

产品名称：人外周血淋巴细胞分离液（FICOLL配制）

产品型号：P8900-200

产品特点：人外周血淋巴细胞分离液（FICOLL配制）一种用于分离人外周血淋巴细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液

P8900-200人外周血淋巴细胞分离液（FICOLL配制）的详细资料：

人外周血淋巴细胞分离液（FICOLL配制）产品简介：
本产品是一种用于分离人外周血淋巴细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。其分离原理是根据血细 胞的密度差异（红细胞和粒细胞密度为1.090g/mL左右；淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090g/mL；血小板为 1.030~1.035g/mL），通过离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将淋巴细胞从人外周血或脐带血中分 离出来。

产品指标： 密度 1.077±0.001g/mL 渗透压 290~350mOsm/kgH2O 无菌 0.1μm 滤膜过滤

人外周血淋巴细胞分离液（FICOLL配制）保存条件：
本产品对光敏感，应该室温避光储存，保质期 2 年。无菌开封后，保存于室温。

操作步骤：

1. 取新鲜抗凝全血（EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝均可）或者去纤维蛋白血液，用等体积的全血及组织稀释液 或者PBS稀释全血。

2. 在离心管中加入适量分离液（当稀释后血液体积小于3mL时，加入3mL分离液；大于等于3mL，加入等体积 分离液。但二者的总体积不能超过离心管的三分之二，否则会影响分离效果），将稀释后的血液平铺到分离 液液面上方，注意保持两液面界面清晰。（可以使用巴氏德吸管吸取血液，然后将血液小心的平铺于分离液 上，因为两者的密度差异，将形成明显的分层界面。如果样品较多加样时间较长，在离心之前出现红细胞成 团下沉属正常现象。）

3. 室温，水平转子500~1000g，离心20~30min （血液的体积越大所需的离心力越大，离心 时间越长，佳的分离条件需摸索，离心转 速大不超过1200g）。

4. 离心后将出现明显的分层：上层是稀释的 血浆层，中间是透明的分离液层，血浆与分 离液之间的白膜层即为淋巴细胞层，离心管 底部是红细胞与粒细胞。

5. 小心的吸取白膜层细胞到15mL洁净的离心 管中， 10mL PBS或细胞洗涤液洗涤白膜层 细胞。250g，离心10min。

6. 弃上清，5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞，250g，离心10min。

7. 重复步骤6

8. 弃上清，细胞重悬备用。

参考文献：
《E2F1 mediates the downregulation of POLD1 in replicative senescence》 作者:Shichao Gao,Qiao Song,Jing Liu,Xiaomin Zhang,Xunming Ji,Peichang Wang 期刊:Cellular and Molecular Life Sciences 影响因子:7.014 PMID:30895337