大鼠骨髓单个核细胞分离液试剂盒P8980

大鼠骨髓单个核细胞分离液试剂盒P8980

产品名称:Jinpan 大鼠骨髓单个核细胞分离液试剂盒

产品型号:P8980

产品特点:Jinpan 大鼠骨髓单个核细胞分离液试剂盒
注意事项:
A. 开封前颠倒混匀,本分离液为无菌产品,为延长分离液保存时间,请在无菌条件下启封,避免微生物污染。
B. 分离液使用时应始终保持室温(18℃~25℃),如室内温度较低,可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条
件下离心,可能会导致白膜层中红细胞污染加重。
C. 待分离的组织要求新鲜,避免冷冻和冷藏。

P8980Jinpan 大鼠骨髓单个核细胞分离液试剂盒的详细资料:

Jinpan 大鼠骨髓单个核细胞分离液试剂盒

单个核细胞分离方法 1. 制备骨髓的单细胞悬液。 2. 取一支适当的离心管,加入与骨髓单细胞悬液等量的分离液(分离液少不得少于3 mL,总体积不能超过离心管的三分之二,否则会影响分离效果)。 3. 小心吸取单细胞悬液加于分离液液面上,注意保持两液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取单细胞悬液,然后小心的平铺于分离液上,因为两者的密度差异,将形成明显的分层界面。) 4. 室温,500~900g,离心20~30min。(根据骨髓单细胞悬液的量确定离心条件,单细胞悬液量越大,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件可以自行摸索,以达到分离效果)。 5. 离心后,此时离心管中由上下细胞分四层。层为稀释液层;第二层为环状乳白色单个核细胞层;第三层为透明分离液层;第四层为红细胞层。 6. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色单个核细胞层另一洁净的15mL 离心管中,向离心管中加入10ml细胞洗涤液洗涤白膜层细胞,250g,离心10min。 7. 弃上清,5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞,250g,离心10min。 8. 重复步骤7 9. 弃上清,细胞重悬备用。 骨髓单细胞悬液的制备方法小动物骨髓的采集: 1. 处死动物,无菌提取股骨和胫骨,剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔(注意尽可能少的剪走骨髓腔)。 2. 取1ml的无菌注射器,吸取少量的含有10%标准胎牛血清的稀释液或者是含有血清的培养基,冲洗骨髓腔以获得骨髓。 3. 终制备成2×10 8–1×10 9 /ml 的单细胞悬液备用。大动物骨髓的采集:分层示意图大动物骨髓的采集可采取活体穿刺方法:先将动物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮肤,然后估计好皮肤到骨髓的距离,把骨髓穿刺针的长度固定好。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧,右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入,轻轻左右旋转将穿刺针钻入,当穿刺针进入骨髓腔时常有落空感。连接注射器缓慢抽吸骨髓组织,当注射器内抽到少许骨髓时即停止抽吸。用含10%标准胎牛血清的稀释液调整细胞浓度为2×10 8–1×10 9/ml 的单细胞悬液备用。常用的骨髓穿刺点:股骨:穿刺部位在股骨内侧面,靠下端的凹面处;胸骨:穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处;肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各点的中点;胫骨:穿刺部位是股骨内侧、靠下端的凹面处。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺结束后要用胶布封贴穿刺孔,防止发生气胸。 注意事项: A. 开封前颠倒混匀,本分离液为无菌产品,为延长分离液保存时间,请在无菌条件下启封,避免微生物污染。 B. 分离液使用时应始终保持室温(18℃~25℃),如室内温度较低,可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条件下离心,可能会导致白膜层中红细胞污染加重。 C. 待分离的组织要求新鲜,避免冷冻和冷藏。 D. 部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其带有的静电作用,可能会导致细胞挂壁影响分离效果。 E. 如果要进一步对分离的细胞进行培养,那在制备单细胞悬液和分离过程中,注意无菌操作,避免微生物污染

Jinpan 大鼠骨髓单个核细胞分离液试剂盒

产品特点:

1. 产品内毒素水平已低于 0.12EU/ml、0.06EU/ml 甚可忽略不计;
2. 产品经过逐瓶灯检基本可控制其中不含不溶性微粒物;
3. 产品原料具有生物安全性和可追溯性;
4. 产品全生产过程*按照国家 GMP 标准操作流程进行;
5. 产品包装瓶的安全性及可追溯性;