胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%,不含酚红)

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%,不含酚红)CAS号: 9002-07-7分子式: C6H15O12P3分子量: 24000描述外观使用方法别名储存/保存方法

产品描述
描述
胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA(0.53mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。
在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
外观
溶液
使用方法
1、贴壁细胞的消化:
(1)吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
(2)加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
(3)显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
(4)如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
(5)如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化:不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
基本信息
别名
胰蛋白酶(猪胰); TPCK-胰蛋白酶;Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol; Pseudotrypsin
储存/保存方法
4℃保存,有效期12个月。(-20℃可以保存更长时间)