甘油三酯(TG)含量检测试剂盒BC0625
产品名称:甘油三酯(TG)含量检测试剂盒
产品型号:BC0625
产品特点:甘油三酯(TG)含量检测试剂盒测定意义:TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。 测定原理:用异丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,在420 nm有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG含量成正比。
BC0625甘油三酯(TG)含量检测试剂盒的详细资料:
甘油三酯(TG)含量检测试剂盒
操作步骤:
一、 TG 的提取:
1、 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清待测。
2、 细胞、细菌:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加 1mL 试剂一,超声波破碎 1min(强度 20%,超声 2s,停 1s),8000g, 4℃离心 10min,取上清待测。
3、 血清(浆)等液体样品:直接测定。
二、 测定操作:
1. 分光光度计预热 30min,调节波长到 420 nm,蒸馏水调零。
2. 水浴锅预热到 65℃。空白管 标准管 测定管双蒸水(μL) 40 标准液(μL) 40 TG 待测液(μL) 40 试剂一(μL) 125 125 125 试剂二(μL) 25 25 25 加试剂一后充分混匀,再加试剂二,剧烈振荡 30s,静置,待分层后取上层溶液 30μL,置于新的 EP 管中。
3.甘油三酯含量测定:空白管 标准管 测定管上层溶液(μL) 30 30 30 试剂三 (μL) 100 100 100 试剂四(μL) 30 30 30 充分混匀,65℃水浴 3min 试剂五(μL) 100 100 100 试剂六(μL) 100 100 100 充分混匀,65℃水浴 15min 取出 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板测定 420nm 处吸光度,记为 A 空,A 标和 A 测。注意:空白管和标准管只需测定一次。
甘油三酯(TG)含量检测试剂盒
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1. 血清(浆)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)×100 mL =100×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空) C 标准品:1mg/mL;100mL:血清体积,1dL=100 mL。
2. 组织中甘油三酯含量: (1)按样本蛋白浓度计算 TG 含量(mg/ mg prot)= C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷Cpr =(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷ Cpr (2)按样本质量计算 TG 含量(mg/ g)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷W =(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷ W C 标准品:1mg/mL ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g/mL
3. 细胞、细菌中甘油三酯含量: TG 含量(mg/104 cell)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷细菌或细胞(104 cell /mL) =(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷细菌或细胞(104 cell /mL) C 标准品:1mg/mL。
b.使用 96 孔板测定的计算公式如下
1. 血清(浆)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)×100 mL =100×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空) C 标准品:1mg/mL;100mL:血清体积,1dL=100 mL。
2. 组织中甘油三酯含量: (1)按样本蛋白浓度计算 TG 含量(mg/ mg prot)= C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷Cpr =(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷ Cpr (2)按样本质量计算 TG 含量(mg/ g)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷W =(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷ W C 标准品:1mg/mL ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g/mL
3. 细胞、细菌中甘油三酯含量: TG 含量(mg/104 cell)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷细菌或细胞(104 cell /mL) =(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷细菌或细胞(104 cell /mL) C 标准品:1mg/mL。
注意事项:
1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
2. 加试剂二后需剧烈震荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取。
3. 检出限为 100μ mol/L。
试剂一:自备,取玻璃空瓶,加入 45mL 正庚烷,80mL 异丙醇,盖紧后混匀,4℃保存。
剂二:液体 3mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂五:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。标准品:液体 5mL×1 瓶,1mg/mL 甘油三酯标准溶液,4℃保存。
相关文献:
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