E010100 TS-UNG 温度敏感型UNG酶
产品名称：E010100 TS-UNG 温度敏感型UNG酶
产品型号：
产品特点：E010100 TS-UNG 温度敏感型UNG酶 产品介绍TS-UNG酶基因来源于低温微生物，经大肠杆菌重组表达获得的新型温度敏感型UNG酶。该酶与常规UNG酶相同，能够催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶，对RNA无活性，主要应用于PCR扩增产物的防污染。
E010100 TS-UNG 温度敏感型UNG酶的详细资料：
E010100 TS-UNG 温度敏感型UNG酶
产品介绍:
TS-UNG酶基因来源于低温微生物，经大肠杆菌重组表达获得的新型温度敏感型UNG酶。该酶与常规UNG酶相同，能够催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶，对RNA无活性，主要应用于PCR扩增产物的防污染。TS-UNG酶与常规UNG酶相比，对温度敏感、易于灭活，从而避免了常规UNG酶灭活后残留活性对荧光PCR灵敏度及扩增产物的降解作用。
TS-UNG酶可以在25℃~50℃范围内使用，在37℃左右具有大反应活性。建议在37℃，10min消化含dUTP模板，在50℃，10min或95℃，2min进行灭活。利用TS-UNG酶低温消化、低温灭活的特性，TS-UNG酶可以用于RT-PCR防止扩增污染。
活性定义：
37℃条件下，1小时降解1μg含dU碱基的单链DNA的酶量为1单位。
规格：1U/μl
储存缓冲液：
20 mM Tris-HCl，pH 7.5（25℃），100 mM NaCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% Triton X-100，50% glycerol.
保存条件：
保存于-20℃。并避免保存时反复冻融。
反应条件：
1、反应体系:
|
Component |
Volume per Reaction（μl） |
Concentration in Master Mix |
|
Template |
* |
< 1μg/reaction |
|
Primer 1 |
1~5 |
0.2~1.0μM |
|
Primer 2 |
1~5 |
0.2~1.0μM |
|
d NTPs (replace dTTP for 200μM~600μM dUTP） |
1 |
200μM（dATP、dGTP、dCTP） |
|
10×PCR Buffer |
5 |
1× |
|
25mM MgCl2 |
2~8 |
1.0~4.0mM |
|
Taq（5U/μl） |
0.25 |
1.25U |
|
TS-UNG（1U/μl） |
0.2~0.5 |
0.2~0.5U |
|
H2O |
* |
—— |
|
Total volume |
50μl |
2、Incubate the product for 10min at 37℃；
3、Inactivate TS-UNG by heating to 50℃ for 10min，or 95℃ for 2min；
质量控制：
1、SDS-PAGE电泳纯度大于98%；
2、无核酸外切酶和核酸内切酶活性、RNase酶活性；
注意事项：
1、由于不同目的基因碱基组成不同，因此对TS-UNG酶的敏感度也不同，建议根据试验结果，在0.2~0.5U之间选择TS-UNG适合用量。
2、避免多次冻融，切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有极大影响。3、TS-UNG酶可以在PCR反应前清除不慎污染的U-DNA分子。为有效防止污染，一个实验室必须在所有的PCR反应中均使用dUTP作为dNTPs组分之一进行扩增，使所有扩增产物都成为U-DNA。